1.Elektante la ĝustan ĉelan linion
Elektante la taŭgan ĉelan linion por via eksperimento, bonvolu konsideri la jenajn kriteriojn:
a.Specio: Ne-homaj kaj ne-primataj ĉellinioj kutime havas malpli da biosekurecaj limigoj, sed finfine via eksperimento determinos ĉu uzi kulturon de aparta specio.
b.Trajtoj: Kio estas la celo de via eksperimento?Ekzemple, ĉellinioj derivitaj de hepato kaj reno povas esti pli taŭgaj por toksectestado.
c.Limigita aŭ kontinua: Kvankam elektante el limigita ĉellinio povas havigi al vi pli da ebloj por esprimi la ĝustan funkcion, kontinuaj ĉellinioj ĝenerale estas pli facile kloneblaj kaj konserveblaj.
d.Normala aŭ transformita: Transformitaj ĉellinioj kutime havas pli altan kreskorapidecon kaj pli altan seman efikecon, estas kontinuaj, kaj postulas malpli da serumo en la kulturmedio, sed ilia fenotipo spertis konstantajn ŝanĝojn per genetika transformo.
e.Kreskaj kondiĉoj kaj karakterizaĵoj: Kio estas viaj postuloj por kreskorapideco, saturiĝa denseco, klona efikeco kaj suspenda kresko-kapablo?Ekzemple, por esprimi rekombinajn proteinojn en altaj rendimentoj, vi eble bezonos elekti ĉelliniojn kiuj havas rapidajn kreskorapidecojn kaj la kapablon kreski en suspendo.
f.Aliaj kriterioj: Se vi uzas limigitan ĉelan linion, ĉu ekzistas sufiĉe da stoko disponebla?Ĉu la ĉellinio estas plene karakterizita, aŭ ĉu vi mem devas kontroli ĝin?Se vi uzas eksternorman ĉellinion, ĉu ekzistas ekvivalenta normala ĉellinio, kiu povas esti uzata kiel kontrolo?Ĉu la ĉellinio estas stabila?Se ne, kiom facile estas kloni ĝin kaj generi sufiĉe da frostaj stokoj por via eksperimento?
2. Akiru ĉelliniojn
Vi povas konstrui vian propran kulturon el primaraj ĉeloj, aŭ vi povas elekti aĉeti establitajn ĉelkulturojn de komercaj aŭ senprofitaj provizantoj (te ĉelbankoj).Bonfamaj provizantoj disponigas altkvalitajn ĉelliniojn, kiuj estis zorge testitaj pri integreco kaj certigas, ke la kulturo estas libera de poluaĵoj.Ni rekomendas ne prunti kulturojn de aliaj laboratorioj ĉar ili havas altan riskon de poluado de ĉelkulturo.Sendepende de ĝia fonto, bonvolu certigi, ke ĉiuj novaj ĉellinioj estis provitaj pri mikoplasma poluado antaŭ ol vi ekuzi ĝin.
Afiŝtempo: Feb-01-2023